PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。

原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱：豬細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品貨號：BK-P97048
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點：
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

特異性熒光標(biāo)記：
TaqMan法
TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括絕對定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
鹽酸頭孢唑蘭  Cefozopran hydrochloride  分子式：C19H17N9O5S2.HCl      分子量：551.99

鹽酸萬古霉素  Vancomycin HCl  分子式：C66H75Cl2N9O24.HCl  分子量：1485.72

鹽酸乙胺丁醇  Ethambutol Hydrochloride  分子式： C10H24N2O2.2(HCl)  分子量：277.23

鹽酸左氧氟沙星  Levofloxacin HCl  分子式：C18H20FN3O4.HCl  分子量：397
克拉霉素  Clarithromycin  分子式：C38H69NO13    分子量：747.96

克林沙星  Clinafloxacin  分子式：C17H17ClFN3O3     分子量：365.79

恩替卡韋  Entecavir  分子式：C12H17N5O4     分子量：295.30

法羅培南(鈉)(2.5水)  Faropenem sodium  分子式：2(C12H14NNaO5S).5(H20)    分子量：704.67

紡錘菌素  Netropsin dihydrochloride  分子式：C18  分子量：503.39H26N10O3•2HCl
中性蛋白酶1公斤  人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Phosphatidylcholine 25g/100g/500g/1kg原裝 Sigma P5638  小鼠NANOG同源域蛋白(NANOG)免疫試劑盒 Mouse NANOG Homeobox protein,NANOG ELISA Kit

聚醇嶙酸，英文名或英文縮寫：Ammonium alcohol polyvinyl phosphate，級別：CP，98%，規(guī)格：1克  胃粘液素(GM)ELISA試劑盒 ，英文名： GM ELISA Kit

錄化鋇二水合物 ≥99% Bcrium chloridq dihydrctq 1036-7-9  MouseNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

本二酸氫鉀，英文名或英文縮寫：potewwium xy7nogen phthalate，級別：CP，97%，規(guī)格：100克  ELISAKitPEDF兔色素上皮衍生因子規(guī)格：48T/96T
豬細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒胰胨大豆胨固綠瓊脂shēng huà shì jì容量：100毫升  Humanepstein-barrvirusIgA,EBvIgAELISAKit 人EB病毒IgA(EBvIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(牛肉蛋白胨)  HumanFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISA試劑盒人游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

TEBUFFERPH7.0TE緩沖液012x1MLFrozen  組織半胱氨酸蛋白酶-4(CASP